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蒸發(fā)光散射檢測器的三步驟

點擊次數(shù):1459 發(fā)布時間:2017-09-27
   蒸發(fā)光散射檢測器的三步驟
  蒸發(fā)光散射檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復(fù)雜化,并且由于對溫度其敏感使得基線不穩(wěn)定,與梯度洗脫不相容。另外,示差檢測器的響應(yīng)不如ELSD靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾,并要求被分析化合物帶有發(fā)色團(tuán)。
  ELSD則不受這些限制。不同于這些檢測器,ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩(wěn)定的基線,使得分辨率較好、分離速度更快。另外,因為ELSD的響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)特性,所以ELSD檢測時樣品不要求帶有發(fā)色團(tuán)或熒光基團(tuán)。
  蒸發(fā)光散射檢測器(Evaporative Light Scattering Detector)設(shè)計用于液相色譜系統(tǒng),分析任何揮發(fā)性低于流動相的化合物。ELSD的應(yīng)用范圍包括:碳水化合物,藥物,脂類,甘油三脂,未衍生的脂肪酸和氨基酸,聚合物,表面活化劑,營養(yǎng)滋補品,及組合分子庫等。
  操作原理
  蒸發(fā)光散射檢測器的*檢測原理為,首將柱洗脫液霧化形成氣溶膠,然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā),zui后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。
  步驟1:霧化
  經(jīng)HPLC分離的柱洗脫液進(jìn)入霧化器,在此與穩(wěn)定的霧化氣體(一般為氮氣)混合形成氣溶膠。氣溶膠由均勻分布的液滴組成,液滴大小取決于分析中采用的氣體流量。氣體流量越低形成的液滴越大,液滴越大則散射的光越多,從而提了分析靈敏度,但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發(fā)。每種方法均存在產(chǎn)生*信號噪音比率的*化氣體流量。流動相流速越低要求適當(dāng)霧化的氣體流量也越低。用內(nèi)徑為2.1mm的微徑柱代替內(nèi)徑為4.6mm標(biāo)準(zhǔn)型分析柱,能降低流動相流速,因而提分析的靈敏度。
  步驟2:蒸發(fā)
  氣溶膠中揮發(fā)性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發(fā)。為特定應(yīng)用設(shè)置適當(dāng)?shù)钠乒軠囟?,取決于流動相組成和流速,以及樣品的揮發(fā)性。有機(jī)含量流動相比含水量流動相要求蒸發(fā)的漂移管溫度低。流動相流速越低比流動相流速越要求蒸發(fā)的漂移管溫度越低。半揮發(fā)性樣品要求采用較低的漂移管溫度,以獲得*靈敏度。*溫度需要通過觀察各溫度時的信號噪音比率來確定。
  步驟3:檢測
  懸浮于流動相蒸汽中的樣品顆粒從漂移管進(jìn)入到光散射檢測池。在檢測池中,樣品顆粒散射激光光源發(fā)出的光而蒸發(fā)的流動相不散射。散射光被硅光電二管檢測,產(chǎn)生電信號輸送模擬信號輸出端口,被用于模擬輸出的數(shù)據(jù)采集。

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